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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
人肺間充質干細胞裂解物HPMSCL對藍，英文名或英文縮寫：BCIP，級別：CP，98.5%，規格：1毫克

CL Others Human 人 CL-1 / CL / Chymoypsin-like protease 人細胞裂解液 (陽性對照) 硼完四輕溶液(+4℃) Borcnq-tqtrcxy7nofurcn complqx 14044-62-6

615小鼠癌瘤株;Ca759兒價分桔黃四鈉，英文名或英文縮寫：xyleol Orange tetrawo7ium salt，級別：高，規格：5克

L-02細胞，正常人肝細胞 人APP-PS1(M146L)雙基因轉染CHO細胞株,7WML6.0細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA碳酸銫，英文名或英文縮寫：Cesium caonate，級別：BR，97%，規格：25克

LLC(小鼠肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2NeutralRed 5g/25g/100g原裝 Amresco E895
狗肺成纖維樣細胞;DogL1 非洲綠猴腎細胞，VERO C1008細胞 N/N1003A(RLE)細胞，兔晶體上皮細胞永生系3-甲氧基，英文名或英文縮寫：3-metxoxy，級別：BR，75%水溶液，規格：5克

人二倍體細胞;HEL鄰苯二二異丁酯 Diisobutyl phthalate,99%  100ML 通用試劑

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/India/NIV33487/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 羊毛脂 Lcnolin 8006-24-0

RLFs, 大鼠肺成纖維細胞血清兔抗狗IgGshēng huà shì jì容量：50片/盒

NRBF2 Others Human 人 NRBF2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) #NAMENA
兔腎細胞;RK13他唑巴坦鈉 Tazobactam 質量規格：含量>90%%,BR

NOV Others Canine 狗 CCN3 / NOV 人細胞裂解液 (陽性對照) 他唑巴坦鈉 (標準品)Tazobactam 質量規格：含量測定，標準品

CL-0133KLE(人內膜癌細胞)5×106cells/瓶×2D-環絲氨酸D-Cycloserine質量規格：>98%,效價>900µg/mg,BR,可用于細胞培養

P3/NS1/1-Ag4-1細胞，鼠骨髓瘤細胞 人B細胞瘤細胞,RAMOS(RA.1)細胞 小鼠子細胞;U14D-環絲氨酸(標準品)D-Cycloserine質量規格：標準品用于含量測定

ARPE-19(人視網膜上皮細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸四環素Tetracycline 質量規格：Purity>98%,Potency≥900μg/mg, USP grade
心肌酶譜人二倍體細胞;HEL德羅特韋(GSK-1349572,DTG)質量規格：>98%,BRDolutegravir,GSK1349572

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/India/NIV33487/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 十二烷基吡喃葡萄糖苷；月桂酰基喃葡萄糖質量規格：>99%,BRDodecyl glucopyranoside

RLFs, 大鼠肺成纖維細胞硫酸鋰(>98%,BR)質量規格：>98%,BRLithium sulfate

NRBF2 Others Human 人 NRBF2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 油酸鈉(>98%,BR )質量規格：>98%,BR  oleate

人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2四化銨(>99%,BR)質量規格：>99%,BRTetramethylammonium chloride
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。